Gulcan Bulut, Medical oncologist, Defne Hospital, Uğur Mumcu street, 31030 Antakya, Hatay, Turkey e-mail: gulcanbulut07@gmail.com

Cytotoxic Effect of Palbociclib on Triple Negative Breast Cancer Cell Lines (MDA-MB-231 and MDA-MB-468)

Abstract

Objective: Triple negative breast cancer is the most aggressive breast cancer, and there is no other treatment option than chemotherapy. Palbociclib (PD) inhibits CDK4 / 6 activities. Since the Rb pathway differs according to breast cancer phenotype, sensitivity to PD treatment also varies. In this study, cytotoxic effects of PD in triple negative breast cancer cell lines (MDA-MB-231 and MDA-MB-468) were investigated.

Method: These triple negative cell lines were transplanted into the appropriate medium; propagated in the appropriate incubator. When a sufficient number of viable cells reached, the cells in the medium were treated with palbociclib at the planned dose according to the experimental plan. Cell viability was measured at 24, 48 and 72 hours using the XTT cell viability Kit. IC50 values were calculated with CalcuSyn v2.0 software. Graphs and statistical analysis were done using Graphpad 5.0 software. For data analysis; ANOVA followed by Dunnet tested. p≤0.05 was considered statistically significant.

Results: Palbociclib showed a time-dependent cytotoxic effect with increasing concentrations (1-50 µM) on the MDA-MB-231 and MDA-MB-468 cell lines (p≤0.05). IC50 value at 72 hours was calculated as 26.2 µM for MDA-MB231 and as 34.2 µM for MDA-MB468.

Conclusion: Targeting the CDK4 and CDK 6 system in rapidly proliferating triple negative breast cancer and providing possible cellular arrest with palbociclib was the primary purpose of this study, and the increased cytotoxicity of the drug on cells depending on dose and time was demonstrated in this experiment. This study will shed light on drug combination studies and in vivo studies.

Keywords: Palbociclib, cytotoxicity, triple negative, breast cancer.

Palbosiklib’in Triple Negatif Meme Kanseri Hücre Hatları (MDA-MB-231 ve MDA-MB-468) Üzerine Sitotoksik Etkisi

Öz

Giriş ve amaç: Triple negatif meme kanseri, en agresif meme kanseri türüdür ve kemoterapiden başka bir tedavi seçeneği yoktur. Palbosiklib (PD), Siklin Bağımlı Kinaz (CDK4/6) aktivitelerini inhibe eder. PD, düşük nanomolar konsantrasyonlarda Rb genlerini sağlam olan meme kanseri hücrelerinin proliferasyonunu inhibe eder ve DNA replikasyonunu baskılar. Rb yolu meme kanseri fenotipine göre farklılık gösterdiğinden, PD tedavisine duyarlılık da değişir. PD'nin hormonoterapiyle kombine edilmesi hormon pozitif meme kanseri tedavisinde iyi bir seçenektir. Bu çalışmada PD’nin triple negatif meme kanseri hücre hatlarındaki (MDA-MB-231 ve MDA-MB-468) sitotoksik etkileri araştırılmıştır.

Yöntemler: Triple negatif bu hücre hatları uygun besi yerine ekilip; uygun inkübatörde çoğaltıldı. Yeterli canlı hücre sayısına ulaşınca besiyerindeki hücreler deney planına göre planlanan dozda palbosiklib ile muamele edildi. XTT hücre canlılığı Kiti kullanılarak hücre canlılığı 24,48 ve 72. saatte ölçüldü. Hücrelerin %50 sini öldüren doz: IC50 değerleri CalcuSyn v2.0 yazılımı ile hesaplandı. Her deney üç tekrarlı olarak gerçekleştirildi. Grafikler ve istatistiksel analiz Graphpad 5.0 yazılımı kullanılarak yapıldı. Data analizi için ANOVA, ardından Dunnet test uygulandı. p≤0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Bulgular: Palbosiklib; MDA-MB-231 hücre hattı üzerinde artan konsantrasyonlarda (1-50 µM) zamana bağlı sitotoksik etki gösterdi (p≤0.05). 72. saatteki IC50 değeri ise 26.2 µM olarak hesaplandı. Aynı şekilde, PD artan konsantrasyonlarda (1-50 µM) MDA-MB-468 hücre hattı üzerinde zamana bağlı sitotoksik etki gösterdi (p≤0.05). 72. saatteki IC50 değeri ise 34.2 µM olarak hesaplandı.

Tartışma ve Sonuç: Hızlı prolifere olan triple negatif meme kanserinde CDK4 ve CDK 6 sistemini hedeflemek ve palbosiklib ile olası hücresel arresti sağlamak bu çalışmanın primer amacıydı ve bu hücre kültür deneyi ile palbosiklibin kanserli hücreler üzerinde doz ve zamana bağlı olarak artan sitotoksisitesi gösterildi. Bu çalışma; ilaç kombinasyonu çalışmalarına ve in vivo çalışmalar ışık tutacak niteliktedir.

Anahtar kelimeler: Palbosiklib, sitotoksisite, triple negatif, meme kanseri.

Dicle Med J  2021; 48 (4): 806-814

Doi: 10.5798/dicletip.1037795