ISSN : 1300-2945
eISSN : 1308-9889
Abstract - Determination of P-Glycoprotein Expression by Flow Cytometry in Hematological Malignancies
Behzat Çimen, Berkay Saraymen, İhsan Çetin, Mustafa Yavuz Köker, Aysun Çetin, Bülent Eser

Behzat Çimen, Erciyes University, Faculty of Pharmacy, Department of Biochemistry, Kayseri, Turkey Email: behzatcimen@yahoo.com

ABSTRACT

Objective: Determination the expression of P-glycoprotein is especially problematic for normal tissues because immuno­logical methods are limited in terms of sensitivity. We aimed to determine the expression of P-glycoprotein and CD34 by flow cytometry, and to evaluate the level of expression of P-glycoprotein and CD34 with unresponsive to treatment in pa­tients diagnosed with hematologic malignancy.

Methods: Our study included fifty patients diagnosed with acute myeloblastic leukemia and acute lymphoblastic leuke­mia, and twenty healthy controls who were admitted to Erci­yes University Hematology-Oncology Hospital. The suspend­ed cells from bone marrow samples of patients and the pe­ripheral blood samples of healthy people were marked with P-glycoprotein phycoerythrin and CD34 FITC or PerCP Cy 5.5; and then surface expression was measured by means of flow cytometry.

Results: In 6 of 30 acute myeloblastic leukemia patients P-glycoprotein and CD34 expression, in 6 of 20 acute lympho­blastic leukemia patients P-glycoprotein, in 5 of them CD34 expression were determined. A significant relation between P-glycoprotein and CD34 expressions in acute myeloblas­tic leukemia and acute lymphoblastic leukemia bone marrow samples was reported.

Conclusion: Our data indicate that flow cytometry is more reliable, precise and faster than molecular methods for mea­suring P-glycoprotein expression and suggests the pos­sibility of a significant relationship between P-glycoprotein and CD34 expressions in acute myeloblastic leukemia and acute lymphoblastic leukemia bone marrow samples. The blast cells expressing CD34 on their surface along with P-glycoprotein simultaneously show that multi drug resistance 1 gene is mostly active in immature cells.

Key words: MDR-1 gene, AML, ALL, P-glycoprotein, flow cytometry

Hematolojik Malignansilerde P-Glikoprotein Ekspresyonunun Akım Sitometri İle Belirlenmesi

ÖZET

Amaç: Duyarlılık açısından sınırlı olan immünolojik yöntem­ler kullanılarak özellikle normal dokulardaki P-glikoprotein ekpresyonunun belirlenmesi sorun oluşturmaktadır. Bu çalış­mada hematolojik malignansi tanısı almış ve tedaviye yanıt vermeyen hastalarda P-glikoprotein ve CD34 ekpresyonu­nun değerlendirilmesi için, P-glikoprotein and CD34 ekpres­yonunun akım sitometri ile belirlenmesini amaçladık.

Yöntemler: Erciyes Üniversitesi Mehmet-Kemal Dedeman Hematoloji-Onkoloji Hastanesine başvuran akut miyeloblas­tik lösemi ile akut lenfoblastik lösemi tanısı almış 50 hasta ve yirmi kontrol çalışmaya dâhil edildi. Hastaların kemik iliği örnekleri ile kontrol grubundan alınan periferik kan örnekle­rinden elde adilen süspanse hücreler, P-glikoprotein fikoerit­rin ile ve CD34 FITC ya da PerCP Cy 5.5 antikorları ile işa­retlendi ve daha sonra yüzey ekspresyonları akım sitometri ile ölçüldü.

Bulgular: Çalışmamızda 30 akut miyeloblastik lösemi has­tasının 6’sında (%20) P-glikoprotein ve CD34 ekspresyonu tespit edilirken, 20 akut lenfoblastik lösemi hastasının 6’sında (%30) P-glikoprotein, 5’inde (%25) CD34 ekspresyonu tespit edildi. Akut miyeloblastik lösemi ve akut lenfoblastik lösemi kemik iliği örneklerinde P-glikoprotein ve CD34 ekspresyon­ları arasında anlamlı bir ilişki olduğu görüldü.

Sonuç: Bulgular, akım sitometri yöntemi ile P-glikoprotein ekspresyonunun akut miyeloblastik lösemi ve akut lenfob­lastik lösemi kemik iliği örneklerinde moleküler yöntemlerden daha hızlı, güvenilir ve doğru bir şekilde ölçülebildiğini, P-gli­koprotein ile CD34 ekspresyonları arasında anlamlı bir ilişki olabileceğini göstermiştir. Yüzeyinde CD34 eksprese eden blast hücrelerinin aynı zamanda P-glikoprotein eksprese et­meleri hücrelerdeki çoklu ilaç direnci geninin daha çok olgun­laşmamış hücrelerde aktif olduğunu göstermektedir.

Anahtar kelimeler: Çoklu ilaç direnci-1 geni, AML, ALL, P-glikoprotein, akım sitometri

Dicle Med J  2016;43(1):33-38

doi: 10.5798/diclemedj.0921.2016.01.0634

Volume 43, Number 1 (2016)